第(1/3)頁 可能最開始的時候是張興教授把陸成交給了他讓他來帶陸成做實驗的，但是可能最后陸成已經(jīng)把好多操作都學(xué)完了，他都還沒有開始教的機會。 這就沒辦法證明自己是真的很厲害的這個事實了，畢竟在臨床上的時候，山原齊木自己就被擠下去過，這個事情他可是還沒告訴任何人的。 當(dāng)然還是覺得有那么一些丟人，想從另外一個層面找回點自信。 但是陸成也是華國人，他根本搶不過秦霜，然后呢，秦霜交給了他實驗之后，就似乎開始顯露了他那該死的實驗天賦了。 山原齊木也只能最終接受了這個很‘殘酷’事實，繼續(xù)到當(dāng)前的實驗方案之中了。 其實山原齊木心里還有一個比較郁悶的問題就是，為啥我也是做WB，肯尼師兄也是做WB，陸成就不知道選我呢？ …… 在開始和肯尼師兄學(xué)習(xí)實驗之前，陸成心里默默地回憶了一遍自己理解的WB技術(shù)的全流程。 WB的全稱叫WesternBlot，也就是蛋白質(zhì)印記。是用特異性抗體檢測細(xì)胞內(nèi)特異性蛋白質(zhì)的重要方法之一。 蛋白質(zhì)印跡則是把電泳分離的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到固定基質(zhì)上，然后利用抗原抗體反應(yīng)來檢測特異性的蛋白分子的技術(shù)。 它可以分成以下幾個部分。 第一個首先就是要得到蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)就在細(xì)胞內(nèi)，將其徹底剪碎并且把細(xì)胞裂解開得到細(xì)胞內(nèi)基質(zhì)液，液體中，就含有了大量的蛋白質(zhì)。 然后我們要篩選并且標(biāo)記出我們需要的蛋白質(zhì)，就好像是從無數(shù)的人海中挑選萬中無一的最適合傳承的人一樣，需要進行篩選。 篩選目標(biāo)蛋白的過程，就需要依靠電泳來實現(xiàn)了， 因為我們知道蛋白質(zhì)在溶液中的時候，通過調(diào)節(jié)溶液的PH值，就可以調(diào)整蛋白質(zhì)的帶電狀態(tài)，使其帶正電荷或者負(fù)電荷。 如此一來，我們只需要提前查詢到目標(biāo)蛋白質(zhì)的等電點的PH值，就可以輕易地將其調(diào)整成需要的帶電狀態(tài)，然后將這個PH值的所有帶正電荷的蛋白質(zhì)與帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)分離開。 因為假如目標(biāo)蛋白帶正電荷，那么它在電場中的運動方向必然是與電場方向一致的，而帶負(fù)電荷的便正好與之相反。 這樣才只是第一步的分離， 雖然這一步還有很多其他的蛋白質(zhì)也可能帶正電荷，與目標(biāo)蛋白同方向移動，但是，在運動的過程中，因為蛋白質(zhì)的帶電電荷與質(zhì)量的差異，就可以讓不同質(zhì)量和不同電荷的蛋白質(zhì)，在時間的堆積之下， 產(chǎn)生移動距離的差異，從而使得幾乎相同的蛋白質(zhì)，移動的大概距離一致，產(chǎn)生一條蛋白帶。 而這條蛋白帶子，其實是透明的，而且還可能夾雜有其他的蛋白， 那么接下來就需要最后的關(guān)鍵一步了，那就是在帶子上，接受特異性抗體的沖洗，將目標(biāo)蛋白進行標(biāo)記。 標(biāo)記之后，會產(chǎn)生有色的條帶。 這個時候，我們便可以通過目測蛋白條帶的寬度和顏色的深度不一致，從而將不同實驗組別內(nèi)細(xì)胞內(nèi)含有目標(biāo)蛋白的蛋白質(zhì)的總含量給計區(qū)別開。 顏色較深，且條帶較為寬的，就含量越高，顏色淺，條帶窄的自然含量就少了…… 這樣的測定，叫蛋白含量多少的定性測定。 與此同時，我們還可以對其進行定量測定，那就是，假如我們?nèi)藶榈赝ㄟ^放置不同濃度的蛋白質(zhì)，然后在電泳中制作一條標(biāo)準(zhǔn)蛋白的曲線。 然后再拿我們目標(biāo)蛋白電泳之后的蛋白帶的寬度和濃度與標(biāo)準(zhǔn)蛋白曲線作對比，就可以定量實驗組和對照組中目標(biāo)蛋白的具體質(zhì)量。 …… 這個實驗的目的，就是為了檢測，在我們做實驗的過程中，通過影響了相應(yīng)的基因，是否會對最終的蛋白表達產(chǎn)生影響。 畢竟，幾乎所有基因調(diào)控最終反映在細(xì)胞上的基本要素，都是蛋白質(zhì)的改變。 比如說某一種酶的含量增加或減少，然后因為酶的減少導(dǎo)致下游產(chǎn)物的減少，來控制我們需要達到的正常細(xì)胞狀態(tài)。 就像是在腫瘤細(xì)胞中一樣，我們可以通過基因的改變，調(diào)控其對葡萄糖的攝取量和葡萄糖進入無氧糖酵解的量，從而限制腫瘤細(xì)胞的能量供應(yīng)， 沒了能量供應(yīng)或是少了能量供應(yīng)，腫瘤細(xì)胞就會自然死亡，至少它的擴散和分裂的速度會大大地降低。 或者，更狠的，還可以通過調(diào)控其溶酶體的增加，使得細(xì)胞自行裂解，從而是腫瘤細(xì)胞自行凋亡。 等等等等，可行的辦法很多。 如果把一個病變細(xì)胞比作一只生病了的小貓，它不再可愛，它會傷害你養(yǎng)了的數(shù)十萬只可愛的小貓。 第(1/3)頁